רועי ישורון נולד בתל אביב בשנת 1975, וכיום הוא מתגורר בהוד השרון עם אשתו יהודית ושתי בנותיו, שירה ויעלי. אביו, יצחק צפל ישורון, הוא תסריטאי ובמאי סרטים מוערך ("נועה בת 17"); וסבתו, טובה ישורון-ברמן, היתה ממקימי קופת חולים של ההסתדרות הכללית.
כבן לתסריטאי, חיידק הכתיבה דבק ברועי בגיל צעיר, אולם הוא פנה דווקא לקריירה בתחום העסקי. בגיל עשרים ושלוש מונה לסמנכ"ל בית הספר לבגרות ולפסיכומטרי של יואל גבע, ובגיל עשרים ושבע הקים את חברת הייעוץ וההדרכה Marketwise, בה הוא משמש כיו"ר עד היום.
במקביל לפעילותו העסקית, רועי הוא יזם ופעיל חברתי. בשנת 2007 זכה באות ראש עיריית תל אביב-יפו למתנדב המצטיין, על תרומתו לקהילה. בשנת 2013 הקים את הפרויקט הארצי "התנדבות משפחתית", המעודד משפחות ישראליות להתנדב ולתרום לזולת.